一起新生儿肺炎克雷伯菌感染暴发
编者按：卫生部在2011年发布的《多重耐药菌医院感染预防与控制技术指南》中提出，耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌（CRE）为临床常见多重耐药菌之一，而其中相当重要的一类即为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRPK）。关于CRPK的文献报道不少，但关于该耐药菌暴发的报道却不多，尤其是新生儿中的暴发几乎是“零报道”。然而这次发生在“大上海”的事件，让我们“大开眼界”的同时，也会引发我们对国内事件报道的诸多限制产生新的思考。
关于新生儿中发生携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌（ST76和 ST37分离株）暴发调查
翻译：王凤田 审核/整理：林凯
一、前言（事件经过）
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRPK）在印度被首次发现后，立即成为全球关注的焦点之一。
2013年，在中国首次发现携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌，之后便迅速蔓延。但是，该细菌在新生儿中的暴发非常罕见。
2014年，在不到3个月的时间内，上海市儿童医院新生儿ICU（NICU）和新生儿病房内CRPK显著增多。研究团队在调查后首次在国际上报道了携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌（ST76和 ST37菌株）在新生儿中的聚集流行事件。
二、流行病学调查
实验流行病学：本研究共收集2014年3月-6月儿科患者中非重复的22株CRPK菌株。采用琼脂稀释法进行药敏试验。通过PCR和序列测定检测β-内酰胺酶基因。质粒接合试验分析blaNDM-1的转换特性，S1核酸酶脉冲场凝胶电泳（S1-PFGE）和Southern杂交试验分析细菌耐药基因的特点。PFGE和多位点序列分型（MLST）进行克隆相关性分析。
22株CRPK进行了除替加环素和多粘菌素之外的大部分抗菌药物试验。菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性分别为59%、77%和100%。77.3%（17 / 22）的CRPK菌株blaNDM-1基因阳性，其中16株住院患者分离株为ST37 (n = 9)和 ST76 (n =7)，1株出院患者分离株为ST846。PFGE对 17株blaNDM-1阳性分离株进行分型，9株A型，7株C型，1株B型。质粒接合试验显示88.2 % (15/17)的供体菌将携带blaNDM-1的质粒成功转移到受体菌大肠杆菌J53内。杂交结果表明质粒携带blaNDM-1基因分别约为50-240 kb。
临床流行病学：22名儿童（17名男性和5名女性）年龄中位数为1月（范围：1天到12岁）；最常见的病因是新生儿呼吸窘迫综合征（27.3%，6／22）、支气管肺炎（31.8%，7／22）、新生儿窒息或围产期窒息（13.6%、3／22）；部分患者留置管道，包括气管插管（45.5%，10 / 22），动静脉插管（31.8%，7 / 22），机械通气（9.1%，2 / 22），导尿管（9.1%，2 / 22），和胃管（9.1%，2 / 22）；多数患者（81.8%，18／22）进行抗菌药物治疗，治疗药物包括氨苄西林舒巴坦、头孢噻肟、头孢曲松、亚胺培南和美罗培南。除两例患者死亡外，其它患者治疗后好转或出院。
图1. 15株blaNDM-1阳性肺炎克雷伯菌的S1核酸酶脉冲场凝胶电泳分析图（上图）及Southern杂交试验分析图（下图）。
M：标记菌株（沙门氏菌）；临床分离株：1,8,29,36,37,45,51,58,65,70,77,83,94,42,67
三、问题与应对
1.由于携带NDM-1基因的菌株引起的感染性疾病有较高的发病率和死亡率，特别是在儿童群体中，治疗选择有限，情况更为严重。对入院患者早期监测CRPK感染或定植，可及时控制CRPK株的传播。
2.临床流行病学研究结果表明，容易导致CRE菌株侵入的危险因素（特别是外科手术）包括：留置导尿管、更换病床、使用头孢菌素。对于儿童患者来说，免疫功能低下、侵入性操作和之前使用广谱抗生素情况也可增加CRE感染或定植菌的机会。对儿童患者，应采取严格的感染控制措施预防CRE菌株的定植或感染。具体措施包括：正确的手卫生、标准预防、固定护理人员等。
3.本研究检测到无耐碳青霉烯类基因的CRPK菌株的比例为18.2%（4 / 22）。研究者认为，某些新的机制可能有助于碳青霉烯类抗生素耐药性的产生，如存在新的β-内酰胺酶或某些酶的变体等。该结论有待于进一步研究证实。
文献来源：Outbreak of NDM-1-producing Klebsiella pneumoniae ST76 and ST37 isolates in neonates. Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2016) 35:611–618
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图文编辑：独白
审稿：赵静 孙庆芬
关于新生儿中发生携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌（ST76和 ST37分离株）暴发调查
翻译：王凤田 审核/整理：林凯
一、前言（事件经过）
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRPK）在印度被首次发现后，立即成为全球关注的焦点之一。
2013年，在中国首次发现携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌，之后便迅速蔓延。但是，该细菌在新生儿中的暴发非常罕见。
2014年，在不到3个月的时间内，上海市儿童医院新生儿ICU（NICU）和新生儿病房内CRPK显著增多。研究团队在调查后首次在国际上报道了携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌（ST76和 ST37菌株）在新生儿中的聚集流行事件。
二、流行病学调查
实验流行病学：本研究共收集2014年3月-6月儿科患者中非重复的22株CRPK菌株。采用琼脂稀释法进行药敏试验。通过PCR和序列测定检测β-内酰胺酶基因。质粒接合试验分析blaNDM-1的转换特性，S1核酸酶脉冲场凝胶电泳（S1-PFGE）和Southern杂交试验分析细菌耐药基因的特点。PFGE和多位点序列分型（MLST）进行克隆相关性分析。
22株CRPK进行了除替加环素和多粘菌素之外的大部分抗菌药物试验。菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性分别为59%、77%和100%。77.3%（17 / 22）的CRPK菌株blaNDM-1基因阳性，其中16株住院患者分离株为ST37 (n = 9)和 ST76 (n =7)，1株出院患者分离株为ST846。PFGE对 17株blaNDM-1阳性分离株进行分型，9株A型，7株C型，1株B型。质粒接合试验显示88.2 % (15/17)的供体菌将携带blaNDM-1的质粒成功转移到受体菌大肠杆菌J53内。杂交结果表明质粒携带blaNDM-1基因分别约为50-240 kb。
临床流行病学：22名儿童（17名男性和5名女性）年龄中位数为1月（范围：1天到12岁）；最常见的病因是新生儿呼吸窘迫综合征（27.3%，6／22）、支气管肺炎（31.8%，7／22）、新生儿窒息或围产期窒息（13.6%、3／22）；部分患者留置管道，包括气管插管（45.5%，10 / 22），动静脉插管（31.8%，7 / 22），机械通气（9.1%，2 / 22），导尿管（9.1%，2 / 22），和胃管（9.1%，2 / 22）；多数患者（81.8%，18／22）进行抗菌药物治疗，治疗药物包括氨苄西林舒巴坦、头孢噻肟、头孢曲松、亚胺培南和美罗培南。除两例患者死亡外，其它患者治疗后好转或出院。
图1. 15株blaNDM-1阳性肺炎克雷伯菌的S1核酸酶脉冲场凝胶电泳分析图（上图）及Southern杂交试验分析图（下图）。
M：标记菌株（沙门氏菌）；临床分离株：1,8,29,36,37,45,51,58,65,70,77,83,94,42,67
三、问题与应对
1.由于携带NDM-1基因的菌株引起的感染性疾病有较高的发病率和死亡率，特别是在儿童群体中，治疗选择有限，情况更为严重。对入院患者早期监测CRPK感染或定植，可及时控制CRPK株的传播。
2.临床流行病学研究结果表明，容易导致CRE菌株侵入的危险因素（特别是外科手术）包括：留置导尿管、更换病床、使用头孢菌素。对于儿童患者来说，免疫功能低下、侵入性操作和之前使用广谱抗生素情况也可增加CRE感染或定植菌的机会。对儿童患者，应采取严格的感染控制措施预防CRE菌株的定植或感染。具体措施包括：正确的手卫生、标准预防、固定护理人员等。
3.本研究检测到无耐碳青霉烯类基因的CRPK菌株的比例为18.2%（4 / 22）。研究者认为，某些新的机制可能有助于碳青霉烯类抗生素耐药性的产生，如存在新的β-内酰胺酶或某些酶的变体等。该结论有待于进一步研究证实。
文献来源：Outbreak of NDM-1-producing Klebsiella pneumoniae ST76 and ST37 isolates in neonates. Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2016) 35:611–618
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图文编辑：独白
审稿：赵静 孙庆芬
